PCS-i220A/B柱后衍生儀在15藥典測定中應用

測量方法：

本法系用液相色譜法(通則0512)測定藥材、飲片及制劑中的毒素(以毒素B1、毒素B2、毒素G1，毒素G2總量計)，除另有規定外，按下列方法測定。

液相色譜儀器構成：
等度液相色譜儀（高壓輸液泵一臺、熒光檢測器一臺、柱溫箱一臺、進(jìn)樣器1件、色譜柱一根等）
柱后衍生儀：PCS-i220A/B

色譜柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
高速離心機：離心速度4000轉／分鐘以上
溶劑過(guò)濾器
超聲波清洗器
固相萃取儀
免疫親和柱
分析天平：萬(wàn)分之一
均質(zhì)器（高速攪拌器）：攪拌速度大于11000轉／分鐘

試劑
甲醇：色譜純
乙腈：色譜純
0.05%的碘溶液
超純水
毒素B1.毒素B2、毒素G1、毒素G2對照品

色譜條件
檢測器：熒光檢測器
色譜柱：PC C18 4.6×150mm，5μm
流動(dòng)相：甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)
流速：1.0ml/min
柱溫：40℃
衍生溶液：0.05％的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成)
衍生化泵流速：0.2ml/min
衍生化溫度:70℃
激發(fā)波長(cháng)λex=360nm(或365nm)，發(fā)射波長(cháng)λem=450nm

混合對照品溶液的制備
精密量取毒素混合標準品(毒素B1、毒素B2、毒素G1、毒素G2標示濃度分別為1.0μg／ml、0.3μg／ml、1.0μg／ml、0.3μg／m1)0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為儲備液。精密量取儲備液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。 

供試品溶液的制備
取供試品粉末約15g(過(guò)二號篩)，精密稱(chēng)定，加入氯化鈉3g，置于均質(zhì)瓶中，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉／分鐘)，離心5分鐘(離心速度4000轉／分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過(guò)，量取續濾液20.0ml，通過(guò)免疫親合柱，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進(jìn)入柱子，將水擠出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。 

測定方法
精密吸取上述混合對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積。另精密吸取上述供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，計算出zui終結果。
毒素B1、B2、G1、G2對照品色譜圖：

以上是使用PCS-i220A/B柱后衍生儀 結果基線(xiàn)平穩 峰型窄 檢出限低 檢測準確 *方法要求。